miR-4306通过下调SATB2表达抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移与侵袭

作者：李书林; 廖艺琳; 周子杰; 肖郑伟; 苏凌波; 李俊杰; 蓝青; 陈名迪; 郭徽灵; 颜来鹏; 汤发强^*

来源：江苏大学学报(医学版), 2023, 33(01): 42-48.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y210208

• miR-4306
• 骨肉瘤
• 富含AT序列特异性结合蛋白2
• 上皮-间质转化

目的:研究miR-4306在骨肉瘤细胞中的表达及其对骨肉瘤细胞生物学行为的影响。方法:选取人成骨细胞hFOB 1.19和骨肉瘤细胞Saos-2、MNNG/HOS CI#5,采用qRT-PCR检测miR-4306表达水平。将miR-4306 mimics和阴性对照分别转染至骨肉瘤细胞Saos-2和MNNG/HOS CI#5,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖，Transwell实验检测细胞迁移及侵袭，蛋白质免疫印迹检测细胞内上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)标志蛋白表达水平。通过在线靶基因预测网站Targetscan、Starbase预测miR-4306靶基因可能为富含AT序列特异性结合蛋白2(special AT-rich sequence-binding protein 2, SATB2),荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将miR-4306 mimics、LV-SATB2共转染至骨肉瘤细胞中，检测细胞增殖、迁移、侵袭以及EMT标志蛋白表达水平变化。结果:与人成骨细胞hFOB 1.19比较，骨肉瘤细胞Saos-2、MNNG/HOS CI#5中miR-4306表达明显降低(P均<0.01)。转染miR-4306 mimics后，骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭能力下降，N-钙黏蛋白、血管内皮生长因子表达水平显著降低，E-钙黏蛋白表达水平显著升高(P<0.05或<0.01)。SATB2是miR-4306下游的直接靶标；与miR-4306 mimics+LV-NC组比较，miR-4306 mimics+LV-SATB2组部分逆转miR-4306对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移和EMT的影响。结论:miR-4306在骨肉瘤细胞中呈低表达，其可通过下调SATB2表达抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和EMT。

• 单位
  福建省立医院; 福建医科大学; 福建中医药大学