禽偏肺病毒地高辛核酸探针的制备与应用

作者：陈琳; 刁有祥; 鞠小军; 慕榕; 郑新颖; 刘霞; 孙静; 吴海洋

来源：中国兽医学报, 2012, (01): 23-27.

• 禽偏肺病毒
• 地高辛探针
• 制备
• 应用 aMPV
• digoxigenin-labeled nucleic acid probe
• proparation
• application

根据GenBank中已经发表的B亚型禽偏肺病毒F基因的保守序列设计并合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致的725bp基因片段,回收、纯化PCR产物,用地高辛标记,制备出地高辛标记的aMPV核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与aMPV核酸发生特异性杂交,而与H9N2亚型AIV、NDV、IBV、ORT和E.coil的核酸杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对aMPV的最低检出量为5pg。应用制备的探针对山东省不同地区的605份商品肉鸡和122份商品肉鸭进行了核酸探针检测,阳性检出率分别为36.59%和34.51%。本试验制备的aMPV地高辛探针特异性强、敏感性好,对样品的检测结果表明山东省部分地区的商品肉鸡、肉鸭中普遍存在aMPV感染。

• 单位
  黄岛出入境检验检疫局; 山东农业大学