血管内皮细胞条件性敲除Cx43杂合子小鼠模型建立及其血管功能变化的研究

作者：彭小勇; 周远群; 张紫森; 邓蒙生; 雷艳; 李涛; 刘良明; 王建民; 康建毅; 杨光明^*

来源：中国实验动物学报, 2022, 30(07): 880-886.

• 血管内皮细胞
• 连接蛋白43
• 基因型鉴定
• 血管反应性

目的 建立血管内皮细胞连接蛋白43(connexin 43, Cx43)条件性敲除小鼠模型，并对其血管舒张/收缩功能进行检测。方法 将8只Cx43flox/flox 小鼠与C57BL/6品系野生型(wild type, WT)小鼠交配，子代小鼠继续与C57BL/6小鼠回交9代进行基因背景转换；再将Cx43flox/+小鼠与血管内皮细胞特异性表达Tie2-Cre重组酶小鼠(以下简称Cre小鼠)交配，获得Tie2-Cre/Cx43flox/+小鼠。利用鼠尾PCR试剂盒进行基因型鉴定，Western Blot法和免疫荧光法检测小鼠肠系膜上动脉(superior mesenteric artery, SMA)中Cx43表达。利用离体张力测定技术检测SMA血管舒张/收缩功能，包括去甲肾上腺素诱导的收缩反应性和乙酰胆碱诱导的舒张反应性。结果 PCR电泳和血管蛋白表达检测结果证实Tie2-Cre/Cx43flox/+小鼠成功构建，肠系膜上动脉中Cx43蛋白表达与野生型小鼠相比明显降低(P<0.01)。与WT小鼠相比，部分敲除血管内皮细胞Cx43后使乙酰胆碱诱导的内皮依赖的血管舒张反应性显著降低(P<0.01)。结论 采用Cx43flox/flox 小鼠与血管内皮细胞特异性表达Tie2-Cre重组酶小鼠成功构建血管内皮细胞条件性敲除Cx43杂合子小鼠，该小鼠的肠系膜上动脉中Cx43表达降低，且舒张反应性明显降低，预期可为研究Cx43及其相关结构在血管功能调节中的作用提供动物模型。

• 单位
  大坪医院; 中国人民解放军陆军军医大学