不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响

作者:王美皓; 李自良; 赵彩红; 李倬; 张雪梅; 乔自林; 马忠仁; 王家敏*
来源:中国生物制品学杂志, 2020, 33(11): 1230-1239.
DOI:10.13200/j.cnki.cjb.003190

摘要

目的探讨不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响。方法用含10%牛血清的DMEM培养液培养MDCK细胞,按不同传代比例(1∶4、1∶5、1∶6、1∶7、1∶8)连续传5代,观察细胞形态、长势、致密程度,绘制生长曲线,并通过生长动力学方法评价不同传代比例对MDCK细胞培养效果的影响。同时按最佳传代比例于细胞工厂(1层、10层)中进行扩大培养。结果不同传代比例的MDCK细胞均可在48 h增殖至致密单层,细胞生长曲线均趋于"S"型,细胞最大增殖密度均达11×104个/cm2以上。传代比例为1∶8的MDCK细胞平均最大比生长速率显著高于1∶4、1∶5、1∶6的比例(P <0.05),倍增时间显著短于1∶4、1∶5、1∶6、1∶7的比例(P <0.05)。按1∶8的比例在1层和10层细胞工厂中连续传代培养的MDCK细胞生长良好,且稳定。结论按1∶8比例传代的MDCK细胞培养效果最佳。