外泌体透射电镜样品的制备方法

作者：蔺萌; 王亚婷; 朱美霖; 雷宁静^*

来源：山西医科大学学报, 2019, 50(10): 1482-1484.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2019.10.027

• 外泌体
• 透射电镜
• 样品制备

目的为了达到更好的透射电镜观察效果,总结出一种适用于外泌体等超微结构样品的制备方法。方法以巨噬细胞外泌体为例,培养巨噬细胞RAW264. 7并提取上清液,超速离心纯化外泌体。磷酸缓冲液重悬后稀释5倍、10倍、20倍3个浓度梯度,在碳覆膜铜网上分别滴加样品,吸附90 s,醋酸铀染液负染30 s,透射电镜下观察并总结外泌体样品制备方法。结果透射电镜下可以看到,300目铜网上的外泌体浓度在1. 0×1011/ml左右时,外泌体数量适中,直径在100 nm左右,能明显看到圆盘状,膜结构完整,轮廓清晰。结论相较于常规超薄切片法,这种电镜样品制备方法用于外泌体、核酸、小分子蛋白、人工合成蛋白、纤维、纳米材料等超微结构样品的制备,更有利于透射电镜观察。

• 单位
  基础医学院; 郑州大学