米贝地尔对3,3'-二吲哚甲烷抗肝癌效应的影响及其作用机制

作者：姜袁越; 徐伟; 顾杰; 叶洋; 徐新明; 孙俊; 陈健; 陆荣柱

来源：江苏大学学报(医学版), 2021, 1-6.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.y200261

• T型钙通道阻滞剂
• 3,3’-二吲哚甲烷
• 肝癌细胞
• 胞质游离钙
• p38丝裂原活化蛋白激酶

目的:探讨T型钙通道阻滞剂米贝地尔对3,3’-二吲哚甲烷（3,3’-diindolylmethane,DIM）抗肝癌效应的影响及其潜在的分子机制。方法:选用肝癌SMMC-7721和HepG2细胞,分为对照组,用含10%胎牛血清的高糖培养基培养24.5 h;米贝地尔组,5μmol/L米贝地尔处理24.5 h;DIM组,60μmol/L DIM处理24.5 h;米贝地尔+DIM组,5μmol/L米贝地尔预处理0.5 h,再与60μmol/L DIM共同处理24 h;采用倒置显微镜观察细胞的形态学变化;采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）、裂解的半胱氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase 3）以及磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（phosphorylation of p38 mitogen activated protein kinase,p-p38 MAPK）表达水平;以Fluo-3/AM为探针,观察肝癌细胞胞质游离钙(cytosolic free calcium,[Ca2+]i)水平。结果:与对照组相比,DIM组细胞增殖活力下降,PCNA表达明显降低,凋亡水平升高,cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平明显升高（P均<0.05）;部分细胞形态消失,[Ca2+]i,荧光增强。与DIM组相比,米贝地尔+DIM组细胞增殖活力明显降低,PCNA表达明显下降,凋亡水平进一步升高,且cleaved-caspase 3、p-p38 MAPK表达水平进一步升高（P均<0.05）;多数细胞形态消失,[Ca2+]i荧光增强更明显。结论:T型钙通道阻滞剂米贝地尔可增强DIM抗肝癌作用,可能与[Ca2+]i水平增加以及p-p38 MAPK表达升高有关。

• 单位
  生命科学研究院; 江苏大学