淡豆豉炮制过程中不产毒黄曲霉菌的分布特征及其对产毒菌的拮抗作用

作者：李翠英; 贺婧; 戴家齐; 龙凯; 王立元; 周立分; 杨安金; 徐佳; 翁美芝^*; 谢小梅^*

来源：中草药, 2023, 54(06): 1775-1782.

• 淡豆豉
• 黄曲霉毒素
• 不产毒黄曲霉菌
• 超高效液相色谱-串联质谱技术
• 拮抗能力
• 黄衣上遍
• 再闷

目的 明确淡豆豉Sojae Semen Praeparatum炮制中不产毒黄曲霉菌Aspergillus flavus的分布特征及其拮抗能力。方法 按实验室前期已建立的规范炮制工艺制备淡豆豉，获取淡豆豉炮制中9个不同时间点的样本，各样本用氯硝胺18%甘油培养基（DG-18）进行培养、分离纯化，经形态学初筛、分子生物学鉴定为黄曲霉菌。通过紫外荧光法初筛和超高效液相色谱-串联质谱法（ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）测定黄曲霉菌产毒能力，确定为不产毒黄曲霉菌（简称：不产毒菌）。用平板对峙法检测不产毒菌及其代谢产物对产毒黄曲霉菌标准株（产毒菌）生长的影响。结果 从淡豆豉炮制过程中共筛选出21株不产毒菌，其中“黄衣上遍”过程中的第3、6天分别筛选出3、6株，“再闷”过程中的第3、6、9天分别筛选出2、7、3株，再闷第6天筛选到的不产毒菌最多。不产毒菌对产毒菌的生长抑制率在26.75%～36.69%，抑制效果最好的是F6-L8（指第1批在“黄衣上遍”阶段的发酵第6天样品中筛选到的第8株疑似黄曲霉菌），为36.69%，发酵上清液对产毒菌的抑制率在14.29%～43.23%，抑制效果最好的是Z3-X1（指第2批在“再闷”阶段的第3天样品中筛选到的第1株疑似黄曲霉菌），达43.23%。结论 淡豆豉炮制过程中存在不产毒黄曲霉菌，且在炮制的不同时间点其数量变化呈现“上升-下降-再上升-再下降”的独特趋势，不产毒菌及其发酵液具有抑制产毒菌生长的作用。为进一步研究不产毒黄曲霉菌在淡豆豉炮制过程中的作用、黄曲霉毒素污染的生物防控提供实验依据。

• 单位
  江西中医药大学; 南昌大学转化医学研究院; 江西中医药大学附属医院