摘要
制备呋喃唑酮代谢物AOZ的单克隆抗体并建立AOZ检测的酶联免疫分析方法。用CPAOZ-BSA免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2/0融合,经过筛选和克隆化后得到5株可分泌抗AOZ衍生物NPAOZ的单克隆抗体的杂交瘤细胞株。其中CPAOZ45D7对NPAOZ的抑制效果最好。经鉴定,CPAOZ45D7的亲和常数为2.5×109L/mol。用CPAOZ45D7包被酶标板,CPAOZ-HRP作为酶标记物建立了检测AOZ的酶联免疫分析,其曲线范围为1.3~130.0ng/mL,灵敏度为0.2ng/mL,批内变异<15%,批间变异<15%。用该方法测得AOZ在牛奶中的回收率为88%~121%
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