摘要
为了研究低氧胁迫(0.8±0.1) mg/L和复氧(7.3±0.5) mg/L对长吻鮠(Leiocassis longirostris)鳃组织氧传感蛋白、呼吸代谢、氧化应激、组织结构和细胞凋亡的影响。本研究对长吻鮠进行了低氧胁迫(0、2、4、6 h)和复氧(2、4、6 h)试验,采用qRT-PCR、酶活性测定、H&E染色和TUNEL切片检测等方法,比较和分析了该鱼鳃组织低氧应答基因、生理生化指标的变化。结果表明:在低氧胁迫下,长吻鮠鳃组织氧传感蛋白相关基因(HIF-1α、HIF-2α、PHDs和Vhl)表达量显著升高,复氧后较对照组仍有显著差异(P<0.05);糖酵解相关酶(PFK、HK和PK)、无氧呼吸酶(LDH)、抗氧化酶(GSH-Px、CAT和SOD)和氧化应激指标(MDA和LPO)活性和含量显著升高,TCA循环相关酶(SDH和MDH)活性显著降低,复氧后多数生理指标均逐渐恢复至对照水平。H&E染色显示低氧胁迫下长吻鮠鳃组织上皮出现了抬升,部分血细胞大量聚集使鳃小片顶端呈棒状,发生线粒体丰富细胞肿胀和增生等变化,在恢复溶氧后低氧引起的这些组织形态变化并未得到改善;TUNEL切片结果显示长吻鮠鳃组织凋亡细胞数量随低氧时间延长不断增加,凋亡相关基因(Bax、Caspase 3、p53和Apaf-1)表达量显著升高,Bcl-2表达量显著降低,恢复溶氧后细胞凋亡现象仍然存在。低氧胁迫和复氧对长吻鮠鳃组织氧传感蛋白、呼吸代谢、氧化应激、组织结构、细胞凋亡等具有明显的影响,该结果为探究鱼类低氧胁迫下分子调控机制奠定一定的理论基础,为今后开展长吻鮠耐低氧新品种选育提供基础资料。
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单位南京师范大学; 菏泽学院; 生物工程学院