E2F1 siRNA通过抑制血红素诱导的神经元凋亡发挥保护作用

作者：赵丹; 李贤玉; 袁美春; 吴艳; 石柳柳; 张志锋^*

来源：安徽医科大学学报, 2020, 55(06): 842-847.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.06.005

• 脑出血
• 血红素
• 转录因子E2F1
• 细胞凋亡
• 神经保护

目的探讨E2F转录因子1(E2F1)在血红素诱导的大鼠原代皮层神经元损伤中的作用及机制。方法体外培养大鼠原代皮层神经元并鉴定,采用不同浓度血红素处理神经元,12 h后LDH实验及MTT实验检测细胞损伤;免疫荧光双染观察神经元E2F1定位;Western blot检测神经元E2F1表达;将神经元分为溶剂组(DMSO组)、损伤组(Hemin组)、阴性对照组(Hemin+Control siRNA组)、治疗组(Hemin+E2F1siRNA组)进行TUNEL染色及caspase活性检测。结果神经元培养至第7天,NeuN染色阳性率达95%;血红素(50、100、200μmol/L)处理后神经元LDH释放率增加、细胞生存率降低、E2F1表达上调(F=22.9,P<0.05);与阴性对照组相比,治疗组神经元LDH释放率降低([(73.6±5.2)%vs(42±4.1)%,F=343.4,P<0.05]、细胞生存率升高[(28.7±3.4)%vs(61±2.9)%,F=127.7,P<0.05];TUNEL结果显示血红素诱导神经元凋亡增加,治疗组凋亡减少(F=67.2,P<0.05);caspase活性检测显示血红素损伤组神经元caspase-3、caspase-8、caspase-9活性升高(t=15.7,t=9.7,t=7.8,P<0.05),治疗组caspase-3、caspase-8、caspase-9活性降低(t=8.6,t=7.3,t=5.7,P<0.05)。结论 E2F1 siRNA可能通过抑制血红素诱导的神经元凋亡而发挥神经保护作用。

• 单位
  湖北医药学院