摘要
目的 构建一种基于时间分辨荧光纳米微球的赭曲霉毒素A (ochratoxin A, OTA)侧流层析试纸条。方法基于免疫层析原理,以时间分辨荧光纳米微球为信号探针,降低非特异性荧光的干扰,提高检测灵敏度,并通过优化样品提取液和样品稀释液,进一步提高现场检测OTA的灵敏度和准确性。结果 OTA在1.0~50.0μg/kg范围内,T线和C线荧光强度比值与OTA浓度的对数线性关系良好,相关系数r2为0.9981~0.9998。不同基质中OTA的检出限和定量限分别为0.401~0.614μg/kg和0.973~1.617μg/kg,加标回收率为89.53%~118.37%,相对标准偏差(relative standard deviations, RSDs)小于12%(n=3),且与将呕吐毒素、伏马菌素B1、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的交叉反应率均小于5%,特异性良好。OTA侧流层析试纸条基于荧光定量快速检测技术平台可在8 min内快速准确地定量测定出待测样本中OTA含量。结论 本研究所制备的时间分辨荧光侧流层析试纸条可实现玉米、小麦和饲料中OTA的快速定量检测,并具有成本低、灵敏度高、操作简便、准确高、重复性好、特异性好的优点,可满足国内外OTA检测的技术要求,为真菌毒素的快检技术的发展提供了技术支撑。
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单位国家粮食和物资储备局科学研究院