摘要
【目的】探讨miR-145靶向调控Smad3对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。【方法】骨髓间充质干细胞诱导分化0、3、7、10、14 d后,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测ALP活性;Western blotting检测Runx2、osteopontin、Smad3的蛋白表达;RT-PCR检测miR-145的表达;miR-control、miR-145 mimics、anti-miR-control、miR-145 inhibitors及pc DNA-control和pc DNA-Smad3转染h BMMSCs,并进行miR-NC+miR-145 mimics、Wt-Smad3+miR-145 mimics、Mut-Smad3+miR-143 mimics3组共转染,检测ALP活性及Runx2、osteopontin、Smad3的蛋白表达。【结果】随着时间的延长,ALP活性及Runx2和osteopontin的蛋白表达升高,与0 d比较差异具有统计学意义(P<0.01);Smad3是miR-145的靶基因;随着时间延长miR-145的表达降低,而Smad3表达升高,与0 d比较差异具有统计学意义(P<0.01);miR-145 inhibitors组ALP活性及Runx2和osteopontin的蛋白表达显著高于anti-miR-control,pc DNA-Smad3组ALP活性及Runx2和osteopontin的蛋白表达显著高于pc DNA-control组(P<0.01)。【结论】miR-145可靶向调控Smad3促进人骨髓间充质干细胞的成骨分化。
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单位西安交通大学第一附属医院