豆豉纤溶酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：陆云华; 张新

来源：安徽农业科学, 2007, (23): 7104+7107.

• 豆豉纤溶酶
• 基因克隆
• 高效表达 Douchi fibrinolytic enzyme
• Gene cloning
• Overexpression

根据已发表的豆豉纤溶酶基因DNA序列(GeneBank AY720895.2),设计并合成了一对引物,应用PCR技术以筛选的来自豆豉的产纤溶酶的芽孢杆菌的总DNA为模板,扩增出了豆豉纤溶酶基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,进行了序列测定,测序结果经Genetool序列分析表明该基因长1 089 bp,编码363个氨基酸,与已发表Brevibacillus laterosporus豆豉纤溶酶基因序列在核苷酸水平上与所发表的序列有98%的同源性;在氨基酸水平上与已发表的芽孢杆菌豆豉纤溶酶同源性为100%。并将该基因克隆到大肠杆菌表达载体pET22b上,在大肠杆菌中实现了高效表达。

• 单位
  宜春学院; 生物工程学院