摘要
目的 探讨雌激素对乳腺癌干细胞(BCSC)增殖及自我更新的影响。方法 以人乳腺癌细胞MCF-7培养BCSC,并采用细胞免疫荧光实验验证;用含0,1,5,10,20,100 nmol/L雌激素的完全培养基培养BCSC 0,24,48,72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖情况;用含0,10,20 nmol/L雌激素的完全培养基培养BCSC 24 h后,观察细胞形态并计算成球率;用含0,1,5,10 nmol/L雌激素的完全培养基培养BCSC 24 h后,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA的表达情况。结果 成功从MCF-7细胞中培养出BCSC。与0 nmol/L比较,1,5,10 nmol/L雌激素作用下,BCSC增殖能力显著增强(P <0.05),且与浓度和作用时间呈正相关;与0 nmol/L比较,10 nmol/L和20 nmol/L雌激素作用下,BCSC体积均显著增大,数量均显著增多(P <0.05);与0 nmol/L比较,1,5,10 nmol/L雌激素作用下,BCSC的PI3K,AKT,mTOR mRNA表达水平均显著升高(P <0.05),且存在浓度依赖性。结论 较低浓度(0~10 nmol/L)的雌激素具有促进BCSC生长的作用,其作用机制可能与活化PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。
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单位重庆医科大学; 基础医学院