微小RNA-19b在胰腺导管腺癌增殖、迁移及侵袭中的作用

作者：胡明星; 付强; 张旭; 禹鹏飞; 秦涛^*

来源：中华实验外科杂志, 2019, (04): 615-618.

• 胰腺癌
• 微小RNA-19b
• 转移
• 增殖

目的 检测微小RNA(miRNA,miR)-19b在胰腺导管腺癌(PDAC)细胞株中的表达,探讨miR-19b在PDAC细胞增殖、迁移及侵袭中的作用。方法 通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测人胰腺导管正常上皮细胞HPDE、人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及人PDAC转移细胞株COLO357和FG中miR-19b的表达水平；构建miR-19b稳定高表达及低表达细胞株。通过Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验验证miR-19b沉默和高表达的PDAC细胞迁移和侵袭能力改变；通过噻唑蓝(MTT)实验和克隆形成实验检测miR-19b沉默及高表达后PDAC细胞增殖能力的变化,并通过Western blot进一步检测PDAC细胞增殖标志物p21及p27在miR-19b沉默及高表达后的表达量改变。结果 RT-qPCR检测结果显示与人胰腺导管正常上皮细胞HPDE中miR-19b表达量(98.21±14.54)比较,人PDAC细胞株PANC1、MiaPaCa2、BxPC3及转移细胞株COLO357、FG中miR-19b的表达量(198.45±21.22、221.37±18.59、182.51±13.48、317.64±15.20、331.34±17.18)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；Transwell小室细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验显示miR-19b沉默后FG细胞的迁移和侵袭能力[(22.54±2.87)%、(28.87±5.62)%]与对照组[(99.65±3.07)%、(98.73±4.38)%]比较明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)；相反BxPC3细胞过表达miR-19b的细胞的迁移和侵袭能力[(317.53±10.21)%、(286.77±12.83)%]与对照组[(97.89±5.31)%、(98.25±7.57)%]比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)；克隆形成实验和MTT实验检测显示miR-19b沉默后PDAC细胞增殖能力[(41.23±0.45)%]与对照组[(62.45±0.21)%]比较明显降低(P<0.01),差异有统计学意义；miR-19b过表达后PDAC细胞增殖能力[(78.27±0.35)%]与对照组[(61.21±0.33)%]比较明显增强,差异有统计学意义(P<0.01)；Western blot结果显示miR-19b沉默后PDAC细胞增殖标志物p21及p27表达量与对照组比较升高(3.25±0.27)、(5.38±0.33)倍,差异有统计学意义(P<0.01)；miR-19b高表达后p21及p27表达量与对照组比较下降(2.68±0.15)、(3.27±0.27)倍,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-19b可促进PDAC细胞迁移和侵袭,可增强PDAC细胞增殖能力。

• 单位
  河南省人民医院; 郑州大学; 河南大学