丹参通络解毒汤对IRI模型大鼠心肌细胞自噬的调控机制

作者：陈欣; 李鑫辉^*; 王静雯; 陈聪; 肖青; 刘仕成

来源：中医学报, 2020, 35(06): 1252-1257.

DOI：10.16368/j.issn.1674-8999.2020.06.283

• 丹参通络解毒汤
• 心肌缺血再灌注
• 自噬
• MALAT1基因
• Toll样受体4
• 核转录因子-κB
• 大鼠

目的:探讨丹参通络解毒汤对缺血再灌注(ischemia reperfusion,IRI)模型大鼠心肌细胞自噬的作用,并观察其对IRI心肌细胞MALAT1、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)信号通路的调节作用。方法:取雄性SD大鼠60只,随机分成5组:空白组,模型组(心肌缺血再灌注),丹参通络解毒汤组,TLR4抑制剂组(TAK-242),丹参通络解毒汤+TLR4抑制剂组。采取结扎左冠状动脉左前降支30 min后松解结扎线30 min的方法建立IRI模型。丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+TLR4抑制剂组以3.9 mL·kg-1的丹参通络解毒汤灌胃,每日1次,空白组、模型组、TLR4抑制剂组给予相同体积的生理盐水灌胃,每日1次。选用酶联免疫吸附法测定血清中磷酸肌酸激酶(creatine phosphate kinase,CK)水平;免疫组织化学法测定心肌组织中LC3Ⅱ蛋白的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定心肌组织中TLR4及NF-κB蛋白的表达,RT-PCR测定MALAT1基因表达。结果:与空白组比较,模型组的心肌细胞损伤明显,血清中CK含量显著升高,LC3Ⅱ、TLR4、NF-κB蛋白和MALAT1基因的表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,丹参通络解毒汤组、丹参通络解毒汤+TLR4抑制剂组、TLR4抑制剂组能明显改善大鼠受损心肌,血清中CK水平明显降低,LC3Ⅱ、TLR4、NF-κB蛋白和MALAT1基因的表达显著降低(P<0.01),且丹参通络解毒汤组CK水平、LC3Ⅱ、TLR4、NF-κB蛋白和MALAT1基因的表达量低于TLR4抑制剂组。结论:丹参通络解毒汤能够抑制IRI心肌细胞自噬,其作用机制可能与通过下调MALAT1基因表达和抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。

• 单位
  湖南中医药大学