细胞自噬在大鼠肺缺血/再灌注引发肝脏损伤中的作用

作者：王肖婷; 汤一冰; 林青青; 王新雨; 宋正阳; 郝卯林; 钱巍; 王万铁^*

来源：中国应用生理学杂志, 2022, 38(02): 102-107.

• 肺
• 缺血/再灌注
• 肝损伤
• 细胞自噬
• 大鼠

目的:探讨肺缺血/再灌注(LI/R)时肝脏损伤的影响，并初步探索细胞自噬(Autophagy)在其中发挥的作用。方法:构建大鼠缺血/再灌注肺损伤(LI/RI)模型，模型制备方法为大鼠麻醉后切开气管进行机械通气，使用动脉夹将肺门夹闭模拟缺血过程，30 min后松开动脉夹，恢复灌注3 h。24只大鼠随机分为伪手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、溶剂组(DMSO组)和自噬抑制剂组(3-MA组),每组均6只，后2组大鼠术前分别腹腔注射DMSO和3-MA,造模结束后使用肺湿/干重比判断造模是否成功；抽取静脉血测定肝脏转氨酶指标ALT与AST;取肝脏组织，光镜下观察肝脏形态改变，以及电镜下观察肝细胞超微结构；使用RT-qPCR和Western blot实验分别检测肝脏组织细胞中自噬相关蛋白的基因mRNA表达水平和蛋白表达水平。结果:与Sham组相比，其余各组肺湿/干重比均升高；血AST和ALT均有大幅升高且肝脏组织损伤明显，其中以I/R组升高最为明显，光镜下组织形态学及电镜下细胞微细结构均有不同程度的破坏；肝脏中自噬相关蛋白的基因表达水平与蛋白表达水平均有明显不同，表现为自噬上升(P<0.01或P<0.05)。I/R组和DMSO组肝脏组织均有较重损伤，肝细胞结构破坏严重，自噬小体形成，而AST、ALT、自噬相关蛋白转录和表达水平等各项指标均无统计学差异(P>0.05)。而相较于DMSO组，3-MA组肝脏组织损伤有所减轻，肝细胞微细结构损伤程度低，且无自噬小体形成，血中AST和ALT下降，肝脏组织内自噬水平均下降(P<0.05)。结论:肺缺血/再灌注可引起大鼠肝损伤；细胞自噬可介导大鼠肺缺血/再灌注引起的肝损伤，抑制细胞自噬可以有效减轻大鼠LI/R引起的肝损伤。

• 单位
  温州医科大学附属第二医院; 温州医科大学