积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎中Th17/Treg细胞表达的影响

作者：栾慧杰; 何莲花; 何娟; 单宏颖; 虎义平; 王庆文^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2022, 28(04): 76-83.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220437

• 积雪草苷
• 胶原诱导型关节炎
• DBA/1小鼠
• 辅助性T细胞17
• 调节性T细胞

目的:观察积雪草苷对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎(CIA)中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)表达的影响。方法:将SPF级DBA/1雄性小鼠按体质量随机分为6组:正常组,CIA组,甲氨蝶呤组(MTX组,0.5 mg·kg-1),积雪草苷低、中、高剂量(5,15,45 mg·kg-1)组。除正常组外,其余组小鼠均构建CIA模型,分别于第1天给予牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂进行一次免疫,第21天给予牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂进行二次免疫,并在二次免疫当天开始给药,MTX腹腔注射方式给药,积雪草苷灌胃方式给药,每天1次,共给药28 d。第49天小鼠取材后,小鼠关节组织进行苏木素-伊红(HE)染色观察病理改变;免疫组化检测Th17细胞标志物IL-17和Treg细胞标志物叉头样转录因子3(FoxP3)的表达情况;免疫荧光双染法检测小鼠关节组织CD4+T细胞中IL-17和FoxP3的表达情况;流式细胞术检测小鼠淋巴结中Th17和Treg细胞比例。结果:与正常组比较,CIA组小鼠关节结构严重紊乱,关节软骨及骨破坏明显,骨侵蚀严重(P<0.01);小鼠关节组织CD4及IL-17阳性染色明显增多,且积分吸光度IA值显著升高(P<0.01),FoxP3阳性染色减少且IA值显著降低(P<0.01),Th17/Treg值显著升高(P<0.01);小鼠淋巴结中Th17细胞表达比例明显增高(P<0.01),Treg细胞的表达比例显著减少(P<0.01);与CIA组比较,MTX组和积雪草苷各剂量组小鼠关节结构均相对正常,骨侵蚀、骨破坏较轻,关节面相对完整光滑;MTX组和积雪草苷中、高剂量组小鼠关节组织中CD4阳性染色减少且IA值明显降低(P<0.05);MTX组和积雪草苷各剂量组IL-17阳性染色明显减少且IA值明显降低(P<0.05,P<0.01);积雪草苷中、高剂量组FoxP3阳性表达明显增加且IA值明显升高(P<0.05,P<0.01);MTX组和积雪草苷中、高剂量组Th17/Treg值明显降低(P<0.05,P<0.01);小鼠淋巴结组织中,积雪草苷各剂量组Th17细胞表达比例明显降低(P<0.05,P<0.01),Treg细胞的表达比例明显增加(P<0.05,P<0.01)。结论:积雪草苷可抑制CIA小鼠Th17细胞的表达,促进Treg细胞的表达,从而调节Th17/Treg平衡。

• 单位
  北京大学深圳医院