青海云杉ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者：王文峰; 李毅; 马彦军; 李栋栋

来源：安徽农业科学, 2009, 37(21): 9869-9871.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2009.21.115

• 青海云杉
• ISSR
• 体系建立
• 优化 Picea crassifolia kom.
• System establishment
• Optimization

[目的]确定适应青海云杉ISSR-PCR反应的最佳反应体系。[方法]以青海云杉(Picea crassifoliakom.)为材料,对影响其ISSR-PCR扩增结果的各因素(Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板DNA、引物、退火温度)进行筛选和优化。[结果]青海云杉ISSR-PCR最佳反应体系为在20μl反应体系中包含1μl10×buffer,1.5 mmol/L的Mg2+,0.2 mmol/L的dNTPs,TaqDNA聚合酶1.0 U,模板DNA40 ng,引物0.6μmol/L。对青海云杉ISSR-PCR最佳反应体系的退火温度进行梯度试验发现,引物UBC818的最适退火温度为54...

• 单位
  甘肃农业大学