摘要

目的 探讨干漆乙醇提取物调控同源盒基因A反义转录3(HOXA-AS3)/微小RNA(miR)-29b分子轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 采用不同水平(0、25、50、75μg/mL)的干漆乙醇提取物处理乳腺癌T47D细胞48 h, CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR检测HOXA-AS3和miR-29b的表达。western blot检测P21、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白的表达。将HOXA-AS3过表达载体(pcDNA3.1-HOXA-AS3)、miR-29b抑制物(anti-miR-29b)分别转染T47D细胞,经75μg/mL的干漆乙醇提取物干预后,采用上述方法检测T47D细胞的增殖、迁移、侵袭以及凋亡变化。双荧光素酶报告基因实验以及qRT-PCR验证miR-29b和HOXA-AS3的靶向关系。结果 干漆乙醇提取物处理可促进T47D细胞P21、Caspase-3和E-cadherin表达,抑制MMP-2表达,抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,并呈一定的剂量依赖性(P<0.05)。干漆乙醇提取物处理可抑制T47D细胞HOXA-AS3的表达,促进miR-29b的表达,并呈一定的剂量依赖性(P<0.05)。过表达HOXA-AS3或抑制miR-29b均可逆转干漆乙醇提取物对T47D细胞增殖、迁移、侵袭以及凋亡的影响(P<0.05)。HOXA-AS3靶向负性调控miR-29b表达。结论 干漆乙醇提取物通过下调HOXA-AS3/miR-29b分子轴可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。

  • 单位
    四川省肿瘤医院