龙葵提取物澳洲茄碱诱导A549细胞凋亡的机制研究

作者：李龙妹; 黄锦鹏; 河文峰; 李秋萍; 吴万垠; 龙顺钦^*

来源：中药新药与临床药理, 2020, 31(12): 1422-1427.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2020.12.006

• 龙葵
• 澳洲茄碱
• A549细胞
• 凋亡
• 半胱天冬酶3
• B淋巴细胞瘤-2家族
• 核因子κB p65

目的探讨龙葵提取物澳洲茄碱(Solasonine,SS)对人肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响及相关的分子机制。方法将浓度为0、15、20、25μmol·L~(-1)的澳洲茄碱分别作用于A549细胞24、48、72 h,将15μmol·L~(-1)的顺铂(DDP)及25μmol·L~(-1)的澳洲茄碱分别作用于A549、PC9、H1650细胞24 h,采用MTT法检测细胞存活率。将15、20、25μmol·L~(-1)的澳洲茄碱及15μmol·L~(-1)的顺铂作用于A549细胞24 h,采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western Blot法检测半胱天冬酶3酶原(proCaspase-3)、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(PARP)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相互作用杀伤蛋白(Bik)、拟南芥类受体激酶(Bak)和核因子κB p65蛋白的表达。结果与空白对照组比较,澳洲茄碱15、20、25μmol·L~(-1)给药组在作用A549细胞24、48、72 h的细胞存活率均明显降低(P <0.05);作用24 h后,澳洲茄碱25μmol·L~(-1)组及顺铂15μmol·L~(-1)组的A549、PC9、H1650细胞存活率均明显降低(P <0.05);澳洲茄碱20、25μmol·L~(-1)组及顺铂15μmol·L~(-1)组的正常细胞占比降低,细胞早期凋亡占比和晚期凋亡占比增加,细胞凋亡率明显升高(P <0.05);澳洲茄碱15、20、25μmol·L~(-1)组A549细胞的proCaspase-3蛋白表达明显下调(P <0.05);澳洲茄碱20、25μmol·L~(-1)组A549细胞的Bcl-2、p65、PARP蛋白表达明显下调,而Bik、Bak蛋白表达明显上调,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论澳洲茄碱可能通过抑制p65、Bcl-2蛋白表达,并增强Bik、Bak蛋白表达,激活Caspase-3通路,进而诱导A549细胞凋亡。

• 单位
  广州中医药大学第二附属医院