CFTR通过调控二磷酸腺苷受体P2Y12影响血小板活化

作者：李俊; 杨涵滟; 韩慧; 李梅^*; 王冠蕾^*

来源：中山大学学报(医学科学版), 2021, 42(04): 521-527.

DOI：10.13471/j.cnki.j.sun.yat-sen.univ(med.sci).2021.0406

• 囊性纤维化跨膜转导调节子
• P2Y12
• 血小板
• 活化

【目的】二磷酸腺苷受体P2Y12介导的血小板活化是血小板活化及血栓形成的核心机制,本研究探讨囊性纤维化跨膜转导调节子(CFTR)对P2Y12介导的血小板活化的影响。【方法】应用8～16周龄CFTR全基因敲除(Cftr-/-)小鼠及野生型(Cftr+/+)小鼠,分别制备胶原蛋白和肾上腺素诱导的肺栓塞小鼠模型。分离Cftr-/-和Cftr+/+小鼠外周血的血小板,采用免疫印迹技术检测P2Y12、PI3K以及AKT总蛋白及磷酸化蛋白的表达。采用二磷酸腺苷(ADP)孵育人巨核细胞株Meg-01,检测ADP对CFTR和上述蛋白表达的影响。进一步应用特异性CFTR氯通道抑制剂CFTRinh-172与Meg-01细胞共孵育,检测其对CFTR和上述蛋白表达的影响。【结果】与Cftr+/+小鼠肺栓塞模型组相比,Cftr-/-鼠肺栓塞组织切片栓塞显著增加。Cftr-/-显著增加小鼠外周血血小板P2Y12、磷酸化PI3K和AKT蛋白表达。P2Y12全基因敲除小鼠血小板CFTR蛋白表达无明显改变,上述结果提示CFTR负性调控P2Y12维持正常血小板活化功能。Meg-01细胞实验结果表明ADP浓度依赖性地诱导Meg-01细胞P2Y12蛋白和PI3K以及AKT蛋白磷酸化增高,而CFTR蛋白表达水平逐渐降低。CFTR特异性阻断剂CFTRinh-172显著诱导Meg-01细胞P2Y12蛋白表达增高。【结论】本研究揭示了血小板活化的一个新机制,即CFTR通过调控血小板P2Y12蛋白表达影响血小板活化。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 中山大学中山医学院