基于脱氧核酶-等温级联放大耦合的传感体系高灵敏检测水样中铅离子

作者：陆云飞; 贾敏; 吴继魁^*

来源：上海海洋大学学报, 2020, 29(06): 840-846.

• 2+" name="keyword">Pb2+
• 荧光传感器
• 等温信号放大
• G-四联体
• 原卟啉锌
• GR-5 DNAzyme

结合等温链替代扩增(ISDA)和指数扩增(EXPAR)设计一种非标记、高灵敏的Pb2+荧光生物传感体系。在Pb2+存在情况下,底物链被活化的GR-5 DNAzyme快速切割释放引物1。引物1与模板1杂交,并被DNA聚合酶(BSM)延伸形成带限制性内切酶(Nt.BbvCI)识别序列的双链核苷酸。BSM从Nt.BbvCI切割产生的切口再次延伸形成双链核苷酸,并释放信号G4-DNA片段。G4-DNA片段同时又可以作为模板2的引物,启动指数放大过程,从而释放更多的信号G4-DNA片段。扩增产物G4-DNA与原卟啉锌(ZnPPIX)相互结合从而产生强烈的荧光信号。详细优化了多种因素对检测体系的影响,在最优实验条件下,此方法对Pb2+的线性检测范围为0.1～50.0 nmol/L,检出限为0.03 nmol/L(S/N=3),回归方程为y=288.7x+744.7(y为荧光强度,x为Pb2+浓度)。干扰实验表明,该传感器对Pb2+具有良好的特异性和选择性。该传感体系成功应用于环境水体中Pb2+含量检测,加标回收率为94.0%～103.0%。本方法操作简单、选择性好、灵敏度高、有较强的抗干扰性能,可用于环境水样中Pb2+的高灵敏检测。

• 单位
  上海海洋大学