蜻蜓凤梨AfACO2基因的克隆及乙烯响应特性分析

作者:雷明; 荆永琳; 王加宾; 李志英; 徐立*
来源:分子植物育种, 2018, 16(23): 7620-7627.
DOI:10.13271/j.mpb.016.007620

摘要

以热带观赏花卉蜻蜓凤梨(Aechemia fasciata)为材料,在分析转录组数据的基础上,通过cDNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA ends, RACE)技术分离得到乙烯生物合成过程中限速酶1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1 carboxylate, ACC)氧化酶(ACC oxidase, ACO)的一个编码基因,并将其命名为AfACO2。AfACO2基因c DNA全长1 615 bp,开放阅读框(open reading frame, ORF)长954 bp,编码的蛋白含317个氨基酸残基。理化性质分析表明,该蛋白分子质量为35.99 kD,等电点为5.13。Af ACO2有保守的抗坏血酸和辅因子亚铁离子结合位点;系统进化分析、同源性比对及基序分析结果表明该蛋白与拟南芥的At ACO2和AtACO4可能具有相似的功能。实时荧光定量PCR (quantitative real time PCR, qRT-PCR)结果表明,AfACO2转录本在心叶和茎中显著高表达,尤其是在抽薹39 d后的成株心叶中表达量最高。此外,AfACO2转录本的表达量受外源乙烯强诱导。研究结果初步证实Af ACO2是蜻蜓凤梨内源乙烯合成的关键酶,为进一步研究Af ACO2功能、通过基因工程手段调控蜻蜓凤梨开花提供了理论依据。

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