摘要
<正>目的制备针对HCV NS3解旋酶的单克隆抗体,分析其识别抗原表位及潜在生物学功能,为HCV诊断和治疗提供关键材料。方法制备截短型重组HCV NS3解旋酶(rNS3,aa1192-1459,1b型),免疫小鼠,按常规方法制备单克隆抗体。采用ELISA和Weston Blot筛选抗rNS3的单克隆抗体。采用29条重叠7个氨基酸的16肽和9条短肽,通过间接ELISA和竞争ELISA测定单抗识别表位。采用HCV(JFH1克隆,2a型)感染huh7.5.1细胞免疫荧光染色法,鉴定单克隆抗体对天然抗原构象的识别特性。结果以rNS3筛选,共获得29株ELISA阳性单克隆抗体,其中27株Weston Blot阳性。
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