微流控实时荧光定量RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR检测两种出血热病毒的比较

作者：杨飞

来源：中华卫生杀虫药械, 2022, 28(01): 64-67.

DOI：10.19821/j.1671-2781.2022.01.018

• 出血热病毒
• 微流控实时荧光定量RT-PCR
• 实时荧光定量RT-PCR

目的 比较微流控实时荧光定量RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR检测两种出血热病毒的情况。方法 以汉城病毒(Seoul virus, SEOV)和汗滩病毒(Hantaan virus, HTNV)作为靶序列设计特异性的引物探针，制备体外转录RNA参考品，对其灵敏性进行评价，通过SEOV和HTNV的假病毒或者病毒培养物制备模拟阳性样本，分别通过微流控和荧光定量RT-PCR检测。结果 SEOV、HTNV体外转录RNA参考品拷贝数浓度分别是2.54×1012、1.26×1012 copies/μl。SEOV、HTNV微流控实时荧光定量RT-PCR检测最低检出限值分别是119.5、123.8 copies/PCR,实时荧光定量RT-PCR检测分别是120.4、128.9 copies/PCR。两种方法检测不同浓度SEOV、HTNV的变异系数均<2%,检出率均为100%。结论 微流控实时荧光定量RT-PCR检测具有很好的特异性、稳定性和灵敏性，适用于现场实验室检测。