miR-214-5p调控MFG-E8表达参与主动脉瓣膜间质细胞成骨样分化

作者：李睿; 杜心灵^*

来源：华中科技大学学报(医学版), 2023, 52(02): 137-144.

DOI：10.3870/j.issn.1672-0741.2023.02.001

• 钙化性主动脉瓣疾病
• miR-214-5p
• MFG-E8
• 成骨样分化

目的 研究乳脂球表皮生长因子8(milk fat globule-epidermal growth factor 8,MFG-E8)对主动脉瓣膜间质细胞(aortic valve interstitial cells, AVICs)成骨样分化的影响，并寻找调控其表达的微小RNA(microRNA,miRNA),探讨其在钙化性主动脉瓣疾病(calcific aortic valve disease, CAVD)发病机制中的作用。方法 收集因CAVD行主动脉瓣置换手术患者的钙化瓣膜标本及因扩张型心肌病行心脏移植手术患者的非钙化瓣膜标本，通过免疫组织化学染色及Western blot实验检测MFG-E8在钙化瓣膜及非钙化瓣膜中的表达；分离AVICs进行体外培养，通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默MFG-E8及成骨培养液(osteogenic medium, OM)干预，研究MFG-E8在AVICs成骨样分化中的作用；TargetScanHuman网站预测调控MFG-E8表达的miRNA并对其功能进行检测；real-time PCR检测miRNA在钙化及非钙化瓣膜中的表达差异。结果 与非钙化瓣膜相比，钙化瓣膜中MFG-E8表达显著上调；以siRNA沉默MFG-E8显著抑制了OM诱导的AVICs成骨样分化；miR-214-5p可影响MFG-E8表达从而调控AVICs成骨样分化；相较于非钙化瓣膜，钙化瓣膜中miR-214-5p表达显著下调。结论 miR-214-5p通过调控MFG-E8表达参与主动脉瓣膜间质细胞成骨样分化，在CAVD发病机制中可能发挥重要作用。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院