AKT3逆转miR-22-3p/29a-3p对LX-2细胞活化的协同抑制作用

作者：张荣花; 张亚楠; 韩向阳; 崔笑妍; 田晓丽; 章广玲^*; 刘志勇^*

来源：安徽医科大学学报, 2023, 58(07): 1132-1139.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2023.07.012

• LX-2
• 丝氨酸/苏氨酸激酶3
• miR-22-3p
• miR-29a-3p
• 增殖
• 迁移

目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT3)能否逆转miR-22-3p/29a-3p对人肝星状细胞LX-2活化的协同抑制作用。方法 利用TargetScan、Starbase、miRDB和DIANA预测miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因，对筛选出的靶基因进行KEGG、GO和蛋白-蛋白互作(PPI)分析；RNAhybrid分析候选靶基因与两个miRNAs结合的自由能，并通过双萤光素酶报告实验确定它们的靶向关系；采用CCK-8、Transwell和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测LX-2细胞增殖、迁移以及纤维化标志物的表达。结果 miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因有24个，且它们富集在与肝纤维化相关的信号通路和生物学过程；候选靶基因AKT3与miR-22-3p和miR-29a-3p的结合自由能分析结合双萤光素酶实验结果提示AKT3是miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因；miR-22-3p和miR-29a-3p mimics能够单独或协同抑制LX-2细胞的增殖、迁移以及纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原α1链(COL1A1)mRNA的表达(P<0.05),AKT3过表达后能够逆转miR-22-3p和miR-29a-3p mimics对LX-2细胞的上述协同抑制作用(P<0.05)。结论 AKT3过表达可逆转miR-22-3p和miR-29a-3p对LX-2细胞活化的协同抑制作用。

• 单位
  华北煤炭医学院; 基础医学院; 华北理工大学