P300/CBP相关因子在BCa细胞DNA损伤修复与肿瘤干细胞干性维持中的作用

作者：李挺云; 周治彦; 周邦奋; 王声兴; 梁培育^*

来源：西部医学, 2023, 35(09): 1264-1269.

• 膀胱癌
• P300/CBP相关因子
• DNA损伤
• 肿瘤干细胞
• 干性维持

目的 探究P300/CBP相关因子(PCAF)在人膀胱癌(BCa)细胞DNA损伤修复与肿瘤干细胞干性维持中的作用。方法 利用Ad-PCAF RNAi转染人膀胱癌细胞系5637,荧光显微镜和Western blot检测转染效果，选择顺铂诱导膀胱癌细胞DNA损伤，MTS法检测损伤细胞的增殖活性，免疫荧光染色检测损伤细胞内PCAF与γ-H2AX的募集情况，细胞彗星实验分析顺铂诱导细胞DNA损伤的程度；从膀胱癌细胞中分选CD44+标记的肿瘤干细胞，Western blot检测Bca干细胞标志物67LR、OCT4及YAP1蛋白表达水平变化，细胞成球实验检测细胞干性变化。结果 Ad-PCAF RNAi转染5637细胞后，明显抑制了细胞中PCAF表达(P<0.05);在下调PCAF表达后，20、40、60、80、100 nmol/L的顺铂处理下5637细胞活性下降，增强了5637细胞对顺铂的敏感性，细胞内γ-H2AX焦点形成明显增加，细胞拖尾较长，拖尾细胞数目和尾距均增加(P<0.05);经分选得到CD44+比例为93%且67LR、OCT4及YAP1蛋白呈阳性表达的膀胱癌干细胞，通过下调PCAF表达，肿瘤干细胞的球体体积变小，成球个数也减少(P<0.05)。结论 通过下调PCAF的表达能够抑制膀胱癌细胞DNA损伤修复，调控肿瘤干细胞的干性维持。

• 单位
  海南医学院第一附属医院