叶螨乙酰胆碱酯酶在pColdⅡ中的表达及活性分析

作者：韦显星; 李博; 张翼鹏; 丁超; 杨金; 彭博; 李梦怡; 卜春亚^*

来源：北京农学院学报, 2020, 35(04): 9-14.

DOI：10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2020.0402

• 朱砂叶螨
• 乙酰胆碱酯酶
• pColdⅡ
• pET-30a
• 纯化
• 活性分析

【目的】为了获得较高活性的螨AChE重组蛋白。【方法】将叶螨ace基因全长和去疏水区两种形式分别在pColdⅡ与pET-30a载体中表达,比较它们的表达效果。【结果】AChE在两种载体中成功表达,得到了较高纯度的AChE。与载体pET-30a比,AChE蛋白在pColdⅡ表达载体中的表达量、酶活性以及对毒扁豆碱的敏感性都更高,去掉羧基端疏水区有助于提高AChE的活性。【结论】此研究建立高活性AChE的表达系统,获得了大量活性较高的AChE重组蛋白,为AChE抑制剂的筛选提供试验基础。

• 单位
  北京农学院