鸡源产气荚膜梭菌重组酶聚合酶扩增检测方法的建立

作者：许笑; 王艳华; MUmar Zafar Khan; 王恒; 蔡建平^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(12): 1475-1483.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0194

• 产气荚膜梭菌
• 重组酶聚合酶扩增技术
• 荧光定量检测
• 鸡坏死性肠炎

为建立鸡源产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)的快速诊断方法,本研究以产气荚膜梭菌α-毒素的编码基因plc为基础设计、合成引物和探针,并以real-time PCR的方法进行验证,建立了鸡源产气荚膜梭菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)检测方法。该方法可在38℃、25 min内对产气荚膜梭菌的α-毒素编码序列进行快速特异性扩增,最低检测限量可达1×101copies/μL,灵敏度良好。以此方法检测实验室保存的临床样本,其检测结果与real-time PCR的检测结果一致。上述结果表明,本研究建立的real-time RPA方法在检测鸡源产气荚膜梭菌时具有操作简单、快速灵敏的特点,适用于鸡源产气荚膜梭菌的临床检测。

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 中国农业科学院兰州兽医研究所