摘要

目的评价内皮祖细胞源性外泌体对氧糖剥夺-复氧复糖神经元损伤的影响。方法培养HT22小鼠海马神经元, 采用随机数字表法分为3组(n=30):对照组(C组)、氧糖剥夺-复氧复糖组(OGD/R组)和氧糖剥夺-复氧复糖+内皮祖细胞源性外泌体组(OGD/R+EXO组)。C组细胞正常培养, OGD/R组采用无糖无血清DMEM培养基在94%N2-1%O2-5%CO2混合气体培养6 h进行氧糖剥夺, 随后更换正常培养基进行复氧复糖24 h。OGD/R+EXO组于氧糖剥夺-复氧复糖造模前24 h在培养基中加入20 μg/ml内皮祖细胞源性外泌体。采用免疫荧光染色法鉴定内皮祖细胞, Western blot法、透射电镜、纳米颗粒追踪分析法鉴定外泌体。采用CCK-8法检测神经元活力, ELISA法测定MDA含量和SOD活性, TUNEL染色法检测神经元凋亡率, Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果培养细胞为内皮祖细胞, 成功提取内皮祖细胞源性外泌体。与C组相比, OGD/R组和OGD/R+EXO组神经元活力降低, MDA含量升高, SOD活性降低, 神经元凋亡率升高, Bax表达上调, Bcl-2表达下调, cleaved-caspase-3/caspase-3比值升高(P<0.05);与OGD/R组相比, OGD/R+EXO组神经元活力升高, MDA含量降低, SOD活性升高, 神经元凋亡率降低, Bax表达下调, Bcl-2表达上调, cleaved-caspase-3/caspase-3比值降低(P<0.05)。结论内皮祖细胞源性外泌体可减轻氧糖剥夺-复氧复糖神经元损伤, 与抑制氧化应激和神经元凋亡有关。

  • 单位
    天津医科大学总医院