口蹄疫病毒3D聚合酶多克隆抗体的制备与特性分析

作者：张昱; 王永录; 张永光; 方玉珍; 潘丽; 蒋守田; 吕建亮; 刘力宽; 张中旺; 张淑刚; 李正丰; 杜进鑫

来源：中国人兽共患病学报, 2010, (01): 6-9.

• 口蹄疫病毒
• 3D聚合酶
• 多克隆抗体 FMDV
• 3D polymerase
• polyclonal antibody

目的表达口蹄疫病毒3D聚合酶,并制备兔抗3D多克隆抗体。方法采用PCR方法扩增口蹄疫病毒(FM-DV)3D聚合酶基因,经BamHⅠ和NdeⅠ双酶切后插入pET-30a(+)原核表达载体,构建的pET-3D重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定目的蛋白的表达并提取包涵体,纯化目的蛋白。然后用纯化蛋白免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,以Western blot鉴定抗体特异性,并以间接ELISA方法测定其效价。结果SDS-PAGE电泳分析显示,表达的目的蛋白约为46ku,与预期结果相符,制备的多克隆抗体效价达1∶8000以上,且具有较高的特异性。结论...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 农业部