摘要
目的分选人骨肉瘤细胞MG-63中的侧群(side population,SP)细胞,并探讨SP细胞对化疗药物耐药的机制。方法以流式细胞术仪检测、分选经DNA染料Hoechst 33342染色后MG-63中的SP细胞,采用CCK-8法检测顺铂对SP细胞与非侧群(non-SP)细胞的抑制率,并计算半数抑制浓度(IC50)。荧光定量PCR法检测SP细胞和non-SP细胞中MRP、XRCC1、MGMT、ABCG2 m RNA的表达水平。结果 MG-63细胞在细胞密度为9×105个/ml、Hoechst 33342终质量浓度为5μg/ml时,MG-63 SP细胞的比例最稳定,为(1.45±0.23)%,且细胞保持良好的活性。顺铂对SP细胞的IC50为11.608μg/ml,对non-SP细胞的IC50为6.876μg/ml,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。MRP、XRCC1、MGMT和ABCG2 m RNA在SP细胞中的表达分别是non-SP细胞的1.58倍、1.61倍、2.36倍和3.14倍(P<0.05)。结论人骨肉瘤MG-63细胞中存在SP细胞亚群,与non-SP细胞相比,SP细胞对顺铂的耐药性更为明显,可能与其耐药基因MRP、XRCC1、MGMT、ABCG2m RNA的高水平表达有关。
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