阻断pannexin-1可减轻肾脏组织炎症细胞浸润和缓解顺铂诱导的急性肾损伤

作者：刘崇斌; 黄柳维; 李彩珍; 沈燕婷; 王骏^*

来源：南方医科大学学报, 2019, 39(05): 508-514.

DOI：10.12122/j.issn.1673-4254.2019.05.02

• 急性肾损伤
• 顺铂
• 肾小管上皮细胞
• pannexin-1

目的探讨阻断pannexin-1在顺铂致急性肾损伤中的作用。方法将26只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone处理组。顺铂模型组、顺铂+Carbenoxolone处理组予顺铂20 mg/kg腹腔注射1次,顺铂+Carbenoxolone处理组于顺铂处理前30 min、处理后24、48 h分别腹腔注射Carbenoxolone 20 mg/kg,所有组于顺铂处理72 h处死小鼠,留取血浆及肾组织样品进行下一步检测。RT-qPCR及Western blot检测肾组织内pannexin-1的表达水平;检测血浆BUN、Scr水平评估肾功能;PAS染色评估肾组织病理学改变;免疫组化检测肾损伤分子1(KIM-1)表达水平及RT-qPCR检测肾损伤分子1与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)mRNA水平评估肾小管损伤情况;免疫荧光检测肾组织F4/80+巨噬细胞及CD4+T细胞浸润水平;RT-qPCR及Western blot检测肾组织pannexin-1的mRNA及蛋白表达水平;用终浓度50μmol/L顺铂刺激人近端小管上皮细胞株HK-2细胞4、6、12、18、24 h构建体外顺铂致急性肾损伤模型;RT-qPCR及Western blot检测HK-2细胞pannexin-1的表达水平。结果与对照组相比,顺铂模型组肾组织pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达上调(P<0.005);体外实验结果显示,与对照组相比,顺铂模型组的pannexin-1蛋白水平及mRNA水平表达水平上调(P<0.005);与顺铂模型组相比,体内应用pannexin-1抑制剂Carbenoxolone处理后,可减轻顺铂所致的肾脏损伤,肾小管损伤程度明显减轻,顺铂+Carbenoxolone处理组的血浆BUN、Scr水平回降(P<0.01),肾组织KIM-1、NGAL表达减少(P<0.05),肾组织浸润的F4/80+巨噬细胞(P<0.01)及CD4+T细胞(P<0.05)减少。结论在顺铂所致急性肾损伤小鼠模型中,Pannexin-1表达显著上调,阻断pannexin-1减少炎症细胞浸润,可减轻肾损伤。

• 单位
  南方医科大学南方医院