低氧促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化

作者：赵彤; 张翠萍; 朱玲玲; 靳冰; 黄欣; 范明

来源：生理学报, 2007, (03): 273-277.

• 神经干细胞
• 低氧
• 分化
• 多巴胺能神经元

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)作为具有多向分化潜能的神经前体细胞,被广泛应用于细胞移植等研究,而低氧不但调节干细胞的体外增殖,在干细胞分化中也具有重要的作用。本文着重探讨了低氧对NSCs分化的调节作用。采用Wistar孕大鼠(E13.5d),分离胚胎中脑NSCs,加入无血清DMEM/F12培养液(含20ng/mLEGF、20ng/mLbFGF、1%N2和B27),3～5d后传代,细胞培养至第三代进行诱导分化,分别在低氧(3%O2)和常氧(20%O2)条件下诱导分化3d,然后在常氧条件下分化成熟5-7d(DMEM/F12含1%FBS、N2和B27)后进行检测。Nestin、NeuN以及TH免疫组织化学鉴定NSCs;流式细胞术分析测定NSCs向TH阳性神经元方向的分化;高效液相色谱测定细胞培养上清液中多巴胺(dopamine,DA)含量。结果显示,分离培养的NSCs均为nestin阳性细胞;低氧呵明显促进NSCs向神经元方向的分化;TH阳性神经元比例在常氧和低氧组分别为(10.25±1.03)%和(19.88±1.44)%。NSCs诱导分化7d后,低氧组细胞培养上清液中DA浓度明显增加,约为常氧组的2倍(P<0.05,n=8)。上述结果表明,3%低氧可促进NSCs向神经元方向,特别是向DA能神经元方向分化。这为NSCs应用于临床治疗帕金森病提供了基础。

• 单位
  军事医学科学院基础医学研究所; 解放军304医院