一种新的离体培养大鼠海马神经元基因转染技术

作者：杜鹏; 杨威; 伍春华; 林豪杰; 范薇; 汪昕

来源：中国临床医学, 2007, 14(1): 35-37.

DOI：10.3969/j.issn.1008-6358.2007.01.012

• 海马神经元
• 大鼠
• 电穿孔
• 基因转染

目的:探讨一种新的离体培养大鼠海马神经元基因转染方法.方法:选用17 d的胚胎SD大鼠,取海马组织分离成细胞悬液,离心去上清并用混有2 μg CAG-RE质粒的电转液重悬,置Neucleofector电转染仪中,选用O-03程序进行电转染,后用基础神经元培养液稀释并接种于培养皿中,4 h后,待细胞贴壁时换新的神经元维持培养液,继续培养,选择不同时间点在荧光显微镜下观察,并计算在转染后4 d时神经元的转染效率.结果:电转染24h后可以观察到有绿色荧光蛋白表达的转染神经元,荧光可以持续表达到2周,转染效率可达60%～80%,神经元生长良好,神经突起显示清楚.结论:电穿孔基因转染技术可以作为离体培养海马神经元很好的基因导入方法.

• 单位
  浙江大学; 神经内科; 复旦大学附属中山医院; 中国科学院