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摘要
背景:已有研究表明富血小板血浆、骨碎补活性成分柚皮甙均可促进间充质干细胞增殖及向成骨分化,二者联合应用的效果尚不明确。目的:观察富血小板血浆联合柚皮甙对人骨髓间充质干细胞体外成骨分化的影响。方法:将第3代成人骨髓间充质干细胞分为4组:(1)空白对照组:α-MEM培养液培养,不加入药物;(2)富血小板血浆组:加入含富血小板血浆的α-MEM培养液培养;(3)柚皮甙组:加入含柚皮甙的α-MEM培养液培养;(4)联合组:加入含富血小板血浆及柚皮甙的α-MEM培养液培养。其中富血小板血浆和柚皮甙含量分别为12.5%、50μg/L。MTT法检测骨髓间充质干细胞的增殖情况,碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色、茜素红染色分析骨髓间充质干细胞成骨分化情况,RT-PCR检测骨髓间充质干细胞成骨分化过程中相关因子的基因表达。结果与结论:(1)富血小板血浆、柚皮甙、富血小板血浆+柚皮甙均能促进人骨髓间充质干细胞增殖,其中富血小板血浆+柚皮甙促细胞增殖作用最显著;(2)碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色、茜素红染色均显示富血小板血浆组、柚皮甙组、联合组呈阳性反应,其中联合组阳性反应更明显,空白对照组呈阴性或弱阳性反应;(3)第7,14天时,富血小板血浆组、柚皮甙组、联合组碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达量明显高于空白对照组(P<0.05),第14天时,联合组碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达量明显高于富血小板血浆组、柚皮甙组(P<0.05);(4)结果表明,富血小板血浆联合柚皮甙对骨髓间充质干细胞体外增殖有促进作用,并能诱导向成骨细胞分化,两者具有相互协同作用。
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