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摘要
目的探讨电穿孔介导的局部基因治疗对兔下颌骨牵引区新生骨痂中Wnt3a和β -连环蛋白(catenin)表达的影响。方法 2019年9—12月, 在南京医科大学友谊整形外科医院实验室进行实验, 新西兰大白兔48只分为对照组、基因治疗组、生理盐水组, 每组16只。3组动物双侧下颌骨截骨后4 d以0.8 mm/d速度行下颌骨牵引, 连续牵引7 d进入固定期。对照组只行牵引;基因治疗组在牵引开始时在牵引区局部注射重组质粒pIRES-hBMP2-hVEGF165, 并给予电穿孔刺激;生理盐水组在牵引开始时, 在牵引区局部注射与基因治疗组相同剂量的生理盐水后, 施加电穿孔刺激。3组分别于牵引结束、固定7、14、28 d取牵引区新生骨骨痂行免疫组织化学染色和RT-PCR检查Wnt3a和β-catenin表达。结果免疫组织化学染色显示, Wnt3a和β-catenin主要定位于骨痂组织的成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞胞质和胞核中。免疫组织化学和RT-PCR检查结果显示, Wnt3a和β-catenin表达在牵引结束时达高峰, 随着牵引张力的消失, 逐渐降低。经基因治疗干预后, Wnt3a和β-catenin基因及蛋白表达显著升高, 与对照组和生理盐水组比较, 基因治疗组在各时点Wnt3a、β-catenin表达量最高, 差异有统计学意义(F=96.3, P<0.01)。结论基因治疗促进牵引区新生骨痂Wnt3a和β-catenin表达, 以此调节骨重建系统的平衡, 从而促进牵引区新骨生成。
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