miR-214对人肝细胞癌增殖能力影响的体外实验研究

作者：郭明明; 蔡锐彬; 邹德志; 赵坤; 刘江辉

来源：中华肝脏外科手术学电子杂志, 2014, 3(05): 47-51.

• 癌,肝细胞
• 微RNAs
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨微小RNA(mi R)-214对肝细胞癌(肝癌)增殖能力的影响及其相关机制。方法应用终浓度50 nmol/L的mi R-214模拟物mimics及其阴性对照mimics分别转染MHCC97L肝癌细胞建立M214组、阴性对照组(NC214组),另设未转染对照组(Ctrl组)。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测3组肝癌细胞mi R-214含量。采用细胞计数试剂盒(CCK)-8法检测细胞增殖抑制率,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测c-myc、Bax、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2蛋白表达。3组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果 M214组MHCC97L细胞mi R-214的含量为Ctrl组的(2 536±7)倍,差异有统计学意义(LSD-t=58.75,P<0.05)。M214组24、48、72 h时细胞增殖抑制率分别为(15.33±0.62)%、(24.07±0.75)%和(41.02±0.91)%,与Ctrl组比较差异有统计学意义(LSD-t=14.64,19.87,31.86;P<0.05)。M214组细胞平板克隆形成数量(5.3±0.7)个/孔,明显低于Ctrl组的(37.1±1.0)个/孔(LSD-t=-12.51,P<0.05)。M214组细胞凋亡率(42.1±3.2)%明显高于Ctrl组的(7.0±0.7)%(LSD-t=35.66,P<0.05)。M214组c-myc、Bcl-2蛋白表达量降低,Bax蛋白表达量升高。结论mi R-214可能通过下调c-myc蛋白表达及Bcl-2/Bax比值抑制人肝癌细胞的增殖能力。

• 单位
  中山大学附属第一医院