漆黄素对高糖诱导视网膜Müller细胞氧化应激炎症反应的作用

作者：胡千慧; 曹睿; 凌云; 郁**^*

来源：锦州医科大学学报, 2022, 43(06): 13-20.

DOI：10.13847/j.cnki.lnmu.2022.06.004

• 糖尿病视网膜病变
• Müller细胞
• 氧化应激
• 炎症
• Akt/Gsk3β信号通路

目的 探讨漆黄素(fisetin, FIS)对高糖诱导的视网膜Müller细胞的作用及其机制。方法 采用100 mmol/L葡萄糖模拟体外高糖环境，实验分为4组：对照组、高糖组、漆黄素+高糖组、漆黄素+高糖+TCBN(Akt/Gsk3β信号通路抑制剂)组。通过CCK8法检测Müller细胞增殖活力；硫代巴比妥酸比色法测定丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量，黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性；DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平；JC-1法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP);免疫荧光检测线粒体膜通透性转换孔(membrane permeability transition pore, mPTP)及IL-1β、IL-6、TNF-α表达；实时荧光定量PCR检测IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA表达；Western Blot检测炎症因子及信号通路蛋白表达。结果 与高糖组相比，漆黄素组降低MDA含量，提高SOD活力，明显抑制ROS产生，抑制mPTP开放，稳定MMP(P<0.05);与漆黄素组相比，TCBN组明显阻断了漆黄素的这种作用。免疫荧光和qPCR结果发现，与高糖组相比，漆黄素组能明显降低IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子表达水平(P<0.05);与漆黄素组相比，TCBN组各炎症因子表达增加(P<0.05)。同时Western Blot结果发现，与高糖组相比，漆黄素组能明显增加p-Akt、p-Gsk3β蛋白表达(P<0.05);而TCBN组p-Akt、p-Gsk3β蛋白表达减少(P<0.05)。结论 漆黄素通过降低细胞内MDA含量、增加SOD活性、抑制ROS产生、mTPT开放来维持MMP稳定，减少炎症因子表达从而减轻氧化应激损伤，这种作用与激活Akt/Gsk3β信号通路有关。

• 单位
  锦州医科大学