基于ERK/NF-κB/COX-2信号通路研究珠子参总皂苷改善对乙酰氨基酚致小鼠肝损伤的作用机制

作者：石孟琼; 张继红; 周刚; 郭巍; 刘英; 包中文; 陈茂华; 谈发明; 胡慧泉; 汪鋆植; 任剑峡; 唐海明

来源：中国中药杂志, 2024, 49(10): 2585-2596.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20240205.702

• 珠子参总皂苷
• 对乙酰氨基酚
• 氧化损伤
• 炎症反应
• 细胞外调节蛋白激酶/核因子κB/环氧合酶-2信号通路

研究珠子参总皂苷（total saponins of Panax japonicus, TSPJ）对对乙酰氨基酚（acetaminophen, APAP）诱导小鼠肝损伤的影响及作用机制。将雄性昆明小鼠随机分为空白组、TSPJ组(200 mg·kg-1,ig)、模型组、APAP+TSPJ低剂量组(50 mg·kg-1,ig)、APAP+TSPJ中剂量组(100 mg·kg-1,ig)、APAP+TSPJ高剂量组(200 mg·kg-1,ig)和APAP+N-乙酰半胱氨酸组(200 mg·kg-1,ip)。给药组每天ig或ip相应的药物，每天1次，连续14 d。末次给药1 h后，除空白组和TSPJ组外，各组小鼠均灌胃给予500 mg·kg-1 APAP,24 h后收集小鼠血清与肝脏组织进行血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）、活性氧（reactive oxygen species, ROS）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）-α、白细胞介素（interleukin, IL）-1β、环氧合酶（cyclooxygenase, COX）-2、IL-6、IL-4、IL-10及肝组织中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）、谷胱甘肽（glutathione, GSH）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、过氧化氢酶（catalase, CAT）、总抗氧化能力（total antioxidant capacity, T-AOC）、丙二醛（malondialdehyde, MDA）、髓过氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）的水平，苏木精-伊红染色观察肝组织形态学改变；实时定量PCR法测定肝组织中淋巴细胞抗原6G（lymphocyte antigen 6G, Ly6G）、半乳糖凝集素3（galectin 3, Mac-2）、TNF-α、IL-1β、COX-2、IL-6、IL-4、IL-10 mRNA表达，Western blot法测定肝组织中Ly6G、Mac-2、细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase, ERK）、磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylated extracellular regulated protein kinase, p-ERK）、COX-2、核因子κB抑制因子α（inhibitor of nuclear factorκB protein α, IκBα）、磷酸化核因子κB抑制因子α（phosphorylated inhibitor of nuclear factorκB protein α, p-IκBα）、胞浆和胞核中核因子κB亚基p65（nuclear factorκB subunit p65, NF-κB p65）蛋白表达。结果显示，TSPJ可显著降低APAP诱导小鼠肝脏系数、血清中ALT、AST、ROS、TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2水平及肝组织LDH、MPO、MDA水平和肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达，升高血清中IL-4、IL-10含量及肝组织中GSH、CAT、SOD、T-AOC水平和肝组织中IL-4、IL-10 mRNA表达；改善肝脏病理损伤程度，抑制肝组织中性粒细胞浸润和巨噬细胞募集；降低肝组织中中性粒细胞标记物Ly6G、巨噬细胞标记物Mac-2和COX-2 mRNA和蛋白表达，降低p-ERK、p-IκBα、胞核NF-κB p65蛋白表达和p-ERK/ERK、p-IκBα/IκBα比率，升高胞浆NF-κB p65蛋白表达。以上结果表明，TSPJ对APAP诱导的小鼠肝损伤有显著保护作用、可减轻APAP引起的氧化损伤与炎症反应，其作用机制与抑制ERK/NF-κB/COX-2信号通路激活，进而抑制炎性细胞浸润、炎症因子生成和抑制肝细胞损伤密切相关。

• 单位
  基础医学院; 宜昌市第二人民医院; 湖北恒安芙林药业股份有限公司; 湖北鄂州二医院; 三峡大学