UⅡα在细锯脂鲤和斑马鱼中的比较分析

作者:徐心怡; 吕为群*; 刘志伟
来源:基因组学与应用生物学, 2020, 39(11): 4918-4927.
DOI:10.13417/j.gab.039.004918

摘要

UⅡ (UrotensinⅡ)是一种能够控制血管收缩和调节渗透压的环状神经肽,在鱼类、鸟类和哺乳动物中均有发现,目前已知鱼类中尾部神经分泌系统(caudal neurosecretory system, CNSS)是UⅡ的主要表达位置。细锯脂鲤(Pristella maxillaris)和斑马鱼(Danio rerio)的形态学比较发现,细锯脂鲤(P. maxillaris)皮肤透明,能清楚地看到肌肉、骨骼和脊髓等组织。基于转录组分析得到的UⅡα转录本片段,通过RACE法克隆了细锯脂鲤UⅡα的cDNA序列,全长共769 bp,其中5’UTR、编码区及3’UTR分别为79 bp、369 bp及321 bp,共编码122个氨基酸。氨基酸比对分析发现该鱼UⅡα蛋白具有保守的6氨基酸环肽结构。物种进化树分析表明,细锯脂鲤与斑马鱼(D. rerio)的物种亲缘关系较近。RT-qPCR分析发现,细锯脂鲤和斑马鱼的尾部神经分泌系统中UⅡα的表达量均为最高,在眼睛、肝脏、大脑、肌肉、精巢、卵巢、鳃、肾脏、皮肤、心脏和肠中表达量较低或不表达。与细锯脂鲤相比,斑马鱼CNSS中UⅡαm RNA的相对表达量更高。整胚原位杂交结果显示,细锯脂鲤和斑马鱼均在3 dpf和5 dpf的胚胎中检测到UⅡαmRNA的表达,但是两者UⅡα表达的时空分布略有不同。该研究首次在细锯脂鲤中克隆UⅡα基因,通过比较形态学、UⅡαm RNA组织分布和早期整胚原位杂交,发现细锯脂鲤因通体透明,在研究UⅡα的表达分布上具有观察优势。

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