西尼罗病毒RNA复制子系统的建立与应用

作者：张富军; 李晓峰; 曹飞; 赵慧; 邓永强; 朱舜亚; 姜涛; 秦鄂德; 秦成峰

来源：军事医学, 2013, 37(02): 114-117.

DOI：10.7644/j.issn.1674-9960.2013.02.008

• RNA
• 西尼罗病毒
• 复制子
• 转染 RNA
• West Nile virus
• replicon
• transfection

目的构建具有复制和表达活性的RNA形式的西尼罗病毒(WNV)复制子。方法在DNA形式的WNV复制子pWNrep的基础上,将其CMV启动子替换成SP6启动子,并在3'UTR端引入PacⅠ酶切位点,构建复制子克隆pSP6-WNrep。同时,将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和海肾荧光素酶(R.luc)报告基因分别插入上述复制子质粒中,获得含有报告基因的复制子pSP6-WNrep/eGFP和pSP6-WNrep/R.luc。将上述克隆线性化后进行体外转录,将转录体RNA转染BHK-21细胞,观察不同时间点绿色荧光蛋白(GFP)的活性和R.luc活性。结果与结论获得了WNV复制子pSP6-WNrep、p...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室