白细胞介素1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞模型的效果评价

作者：乔虎军; 王国祥^*

来源：中国组织工程研究, 2024, 28(04): 516-521.

• 骨性关节炎
• 软骨细胞
• 白细胞介素1β
• 大鼠
• 细胞活力

背景：建立骨性关节炎软骨细胞模型，对进一步解释骨性关节炎的病理过程，评估和筛选骨性关节炎治疗药物具有重要意义。目的：评价白细胞介素1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞模型的效果，为进一步探索药物治疗骨性关节炎提供参考。方法：取3周龄SD大鼠髋关节软骨，机械剪切和酶消化分离软骨细胞并进行鉴定。软骨细胞随机分为3组：对照组、5 ng/mL和10 ng/mL白细胞介素1β组，分别诱导24 h和48 h。MTT法检测软骨细胞的增殖活力；Real-Time PCR检测Ⅱ型胶原蛋白、蛋白聚糖、性别决定区Y框蛋白9、基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5 mRNA表达；Western blot检测Ⅱ型胶原蛋白、性别决定区Y框蛋白9、基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5蛋白表达。结果与结论：(1)成功分离并培养原代大鼠软骨细胞；(2)10 ng/mL白细胞介素1β诱导软骨细胞24 h可使细胞增殖活力显著下降(P <0.05),5 ng/mL白细胞介素1β组则需诱导48 h；(3)Real-Time PCR结果显示，同对照组相比，5 ng/mL和10 ng/mL白细胞介素1β诱导软骨细胞24,48 h，Ⅱ型胶原蛋白、蛋白聚糖、性别决定区Y框蛋白9 mRNA表达水平均显著降低(P <0.05)，基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5 mRNA表达水平均显著增加(P <0.05)；相比10 ng/mL组，5 ng/mL白细胞介素1β诱导软骨细胞48 h可显著增加基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5 mRNA表达(P <0.05)；(4)Western blot结果显示，相比对照组，10 ng/mL白细胞介素1β诱导软骨细胞24 h，Ⅱ型胶原蛋白、性别决定区Y框蛋白9蛋白水平显著下降(P <0.05)，基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5蛋白水平显著增加(P <0.05);5 ng/mL白细胞介素1β诱导软骨细胞48 h，Ⅱ型胶原蛋白、性别决定区Y框蛋白9蛋白水平显著下降(P <0.05)，基质金属蛋白酶13、解聚蛋白样金属蛋白酶5蛋白水平显著增加(P <0.05)；(5)提示干预24 h后10 ng/mL白细胞介素1β对软骨细胞的诱导效果可能更明显；干预48 h后5 ng/mL和10 ng/mL白细胞介素1β的诱导效果相似。

• 单位
  苏州大学; 长治学院