实时RT-PCR检测西尼罗病毒

作者：邓永强; 姜涛; 于曼; 秦成峰; 陈水平; 祝庆余; 秦鄂德

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2005, 25(06): 519-522.

DOI：10.3760/j:issn:0254-5101.2005.06.023

• 西尼罗病毒
• 实时RT-PCR法
• 空斑法 West Nile virus
• Real-time PCR assay
• Plaque assay

目的建立西尼罗病毒快速、敏感和特异的实时RTPCR法,用于西尼罗病毒疾病的早期诊断。方法对Vero细胞增殖的西尼罗病毒分别进行常规RTPCR和实时RTPCR法扩增,以PFU/ml为参考标准,比较二者的敏感性和特异性。并用实时RTPCR法检测西尼罗病毒感染的小鼠组织标本。结果采用所建立的实时RTPCR法和常规RTPCR法可分别检测到0.02PFU/ml和2PFU/ml的西尼罗病毒RNA,前者的敏感性比后者高100倍。而对其他黄病毒科成员的检测均为阴性,表明该方法是特异的。采用这种实时RTPCR法可从西尼罗病毒感染小鼠的血液、脾脏、肾脏和脑组织标本中检测出病毒核酸,且在感染后第2天最先自血液和脾脏...

• 单位
  病原微生物生物安全国家重点实验室; 军事医学科学院