针对前列腺癌的PSMA-CAR慢病毒表达载体的构建及病毒包装

作者：王丙萍; 段金凯; 高维实

来源：现代肿瘤医学, 2021, 29(16): 2774-2779.

• 前列腺特异性膜抗原
• 慢病毒表达载体
• 嵌合抗原受体
• 慢病毒包装

目的:构建针对前列腺特异性膜抗原(PSMA)的CAR慢病毒表达载体,并包装病毒颗粒。方法:设计并合成针对PSMA的CAR基因序列,将设计的CAR片段连入pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro载体中,经酶切、PCR及测序鉴定构建是否成功。应用慢病毒三质粒包装系统将PSMA-CAR载体进行包装,通过荧光显微镜观察及流式细胞仪检测GFP鉴定包装结果及包装时的转染效率。通过超速离心方法浓缩病毒颗粒。结果:成功构建了PSMA-CAR慢病毒表达载体,成功包装了PSMA-CAR慢病毒颗粒且包装时的转染效率为70.43%,经测定获得的PSMA-CAR慢病毒滴度为5×105TU/mL。结论:PSMA-CAR慢病毒表达载体的成功构建及病毒颗粒的包装为应用CAR技术治疗前列腺癌奠定了基础。

• 单位
  内蒙古自治区人民医院; 内蒙古建筑职业技术学院