HRE/Egr-1调控的shTRAIL基因对A549细胞的辐射增敏效应

作者：杨艳明; 王志成; 王铁君

来源：中国生物制品学杂志, 2009, 22(10): 979-982.

DOI：10.13200/j.cjb.2009.10.41.yangym.026

• 乏氧
• 辐射
• TRAIL
• 酶联免疫吸附试验
• 放射敏感性

目的观察HRE/Egr-1调控的shTRAIL基因对肺腺癌A549细胞的辐射增敏效应。方法将前期构建的含有HRE/Egr-1双敏感启动子介导的shTRAIL基因的质粒pcDNA3.1-HRE/Egr1-shTRAIL经脂质体介导,转染肺腺癌A549细胞,将转染细胞分为3组:乏氧组、照射组和乏氧 照射组,分别进行相应处理,并设正常细胞作为对照。RT-PCR检测各组细胞shTRAIL基因mRNA的转录水平;双抗体夹心ABC-ELISA检测各组细胞上清中shTRAIL的含量;平板克隆实验检测各组细胞的放射敏感性。结果乏氧组、照射组和乏氧 照射组A549细胞shTRAIL基因mRNA的转录水平及细胞上清中shTRAIL蛋白的含量均较正常对照组明显增加,其中,乏氧 照射组最高。常氧条件下,转染质粒pcDNA3.1-HRE/Egr1-shTRAIL的A549细胞和正常对照组细胞的D0值分别为1.89和3.26;而在乏氧条件下,两组的D0值分别为1.13和5.81,表明乏氧条件下质粒转染组A549细胞的放射敏感性最高。结论HRE/Egr-1调控的shTRAIL基因在乏氧和辐射条件下,能够诱导A549细胞中shTRAIL基因mRNA转录和蛋白表达水平增加,并增加细胞的放射敏感性。

• 单位
  公共卫生学院; 吉林大学第二医院; 吉林大学