Mitsraria sp.1412产壳聚糖酶的分离纯化及性质研究

作者：尹雅洁; 谭光迅; 胡远亮^*

来源：湖北师范大学学报(自然科学版), 2019, 39(01): 70-75.

• 壳聚糖
• 壳聚糖酶
• 分离纯化
• 酶学性质
• Sephadex G-200凝胶柱层析
• SDS-PAGE凝胶电泳

以实验室选育的Mitsuaria sp.1412菌株发酵产壳聚糖酶,采用硫酸铵分级沉淀,表明沉淀饱和度为60%～90%效果较好,壳聚糖酶纯化倍数达1.85倍。然后依次采用离心超滤、离子交换层析和Sephadex G-200凝胶柱层析进行纯化。SDS-PAGE凝胶电泳检测表明,产物仅有一条清晰的条带,显示该壳聚糖酶的分子量为33.6 kD.酶学性质结果表明,该酶的最适反应pH和温度分别为5.5、50℃,并且该酶在pH5.0～8.0和35～45℃范围内,稳定性良好。酶最大反应速度Vmax为2.8μmol/min,常数Km为168.4 mmol/L.对该酶的酶解产物进行分析发现其酶解产物为壳二糖和壳三糖。

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 生命科学学院; 湖北师范大学