摘要
采用3-(4,5-二甲基-2-噻唑基)-2,5-二苯基溴化四唑(MTT)法测定对叶百部总生物碱(0、10、22、50、112和250 μg/mL)和过氧化氢(0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0和8.0 mmol/L)对V79细胞的细胞毒性,并使用细胞活力测定、Hoechst 33258染色法、流式细胞术和Western blot法等方法观察对叶百部总生物碱对H2O2(5.0 mmol/L,24 h)所致V79细胞损伤的保护作用.结果显示,对叶百部总生物碱对V79细胞无明显细胞毒性,而H2O2抑制细胞增殖作用明显,呈剂量相关性,其IC50值为4.42±0.45 mmol/L,而对叶百部总生物碱能显著降低H2O2(5.0 mmol/L,24 h)诱导的V79细胞毒性(P<0.05,P<0.01),可显著拮抗H2O2所致V79细胞凋亡作用(P<0.05,P<0.01),并能显著上调V79细胞中的Bcl-2蛋白表达,下调Bax和激活型半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达(P<0.05,P<0.01).故认为对叶百部总生物碱对H2O2所致V79细胞凋亡具有良好的保护作用,其机制可能与下调Bax、Cleaved Caspase-3的表达和上调Bcl-2表达有关.
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